目前用于体外凋亡检测方法有：流式细胞术、TUNEL检测法、DNA检测等，每种方法都有自身的局限性?？突г诮邢赴蛲黾觳馐?，可根据样本特点，选择合适的方法或多种方法同时进行检测。

Annexin V/PI法：

Annexin V/PI法是目前较为流行的检测细胞凋亡的方法。AnnexinV是一种钙依赖性的磷脂结合蛋白，对磷脂酰丝氨酸（phosphatidyl-serine,PS）具有较高的亲和性，它可以较为敏感的检测细胞膜表面的翻转的PS。将Annexin-V进行荧光素（FITC、PE）标记，以标记的

Annexin-V作为荧光探针，利用流式细胞或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。该方法快速可靠，不需要固定细胞，从而避免了Tunel法因固定而出现的DNA丢失。 Annexin V/PI法是目前较为理想的检测细胞凋亡的方法，缺点是细胞膜的改变持续时间有限，选择检测的

时机很重要。该方法用于细胞的早期凋亡检测。

Tunnel 检测法

细胞凋亡中断裂的DNA链会产生大量的3 -OH末端，把脱氧核糖核苷酸转移酶（TdT）和生物素或地高辛标记的dUTP放在一起温育，TdT将标记的dUTP连接到凋亡细胞的DNA3’ -OH末端，然后再用荧光染料标记的生物素或地高辛抗体作为二抗进行反应，这样就可以使产生DNA断裂的凋亡细胞标记有荧光。正常细胞几乎没有DNA断裂，很少能够被染色，而凋亡细胞则显色。但Tunel法也有局限性，如：组织固定、处理的过程本身

会改变检测结果，对细胞凋亡不是特异性的，坏死细胞液会被标记。尽管如此，Tunnel 法在体外原位检测方面显示出*性，被广泛应用。该方法用于细胞晚期凋亡检测。

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