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    产品中心

    当前位置:首页产品中心DiacloneELISA Kit人白介素27 ELISA 试剂盒

    人白介素27 ELISA 试剂盒
    产品简介:

    人白介素27 ELISA 试剂盒用于体外定量检测人血清,血浆,缓冲液或细胞培养液中的白介素27。

    产品型号:

    更新时间:2025-06-30

    厂商性质:代理商

    访问量:916

    服务热线

    01084640949

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    产品介绍

    Human IL-27 ELISA Kit

     用途:人IL-27 ELISA试剂盒用于体外定量检测人血清,血浆,缓冲液或细胞培养液中的白介素27。此试剂盒只用于科研,不能用于诊断。

    检测原理:

    IL-27试剂盒应用的是夹心法固相酶联免疫吸附分析法(ELISA)。IL-27特异单克隆抗体被包被于微孔板上,已知IL-27浓度的标准品和未知浓度的样品可在此反应孔中进行检测。先将IL-27抗原和生物素标记IL-27特异单克隆抗体同时孵育。洗涤后加入亲和素过氧化物酶,孵育后洗去未结合的酶。其后加入底物,产生颜色反应,颜色的深浅与样品中IL-27的浓度成一定的比例关系。

    试剂盒组成及配制:

     

    试剂(2-8保存)

    1x96孔的配置

    产品编号:#850.960.048

     

    配制

    96T微孔板

    1

    即用型(已包被)

    塑料板盖

    2


    标准品:1000pg/ml

    2瓶

    按瓶上的说明稀释(见试剂制备,)

    标准品稀释缓冲液

    1瓶(25ml

    即用型

    生物素标记IL-27抗体

    1瓶(0.4ml)

    用生物素标记抗体稀释液稀释(见试剂制备)

    生物素标记抗体稀释液

    1瓶(7.5ml)

    即用型

    亲和素-HRP

    2瓶(5ul)

    0.5ml HRP稀释液预稀释(见试剂制备,)

    HRP稀释液

    1瓶(23ml)

    即用型

    洗涤缓冲液

    1瓶(10ml)

    200x,蒸馏水稀释(见试剂制备)

    TMB

    1瓶(11ml)

    即用型

    H2SO4终止液

    1瓶(11ml)

    即用型

     

    自备材料:

    蒸馏水;加样器:10ul, 50ul, 100ul, 200ul, 1000ul; 漩涡振荡器和磁力搅拌器

    保存条件:

    试剂盒保存于2-8度,

    洗涤缓冲液:制备好后,2-8度可保存1周以上

    标准品:制备好后即用,不要保存。

    生物素标记二抗:制备好后即用,不要保存。

    亲和素-HRP: 制备好后即用,不要保存。

    样品收集,处理和保存:

    1.       细胞培养上清:1000xg离心10分钟去除颗粒和聚合物。

    2.       血清——操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000xg离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

    3.       EDTA,柠檬酸盐和肝素血浆可用于检测。1000Xg离心30分钟去除颗粒。

    4.       如果样品不直接使用,将其分为小部分(250-500ul-70℃下保存,避免反复冻融。

    如果可能,不要使用溶血和高脂血。如果血清中有大量的颗粒,检测前先离心或过滤。

    注意:不要在37℃或56℃加热解冻。在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻

    检测程序

    使用前,将所有试剂充分混合,不要使液体产生泡沫。根据样品数量加上空白,标准品决定所需的板条,每个样品,标准品,空白和质控都应做双份。

    详细步骤

    1

    制备标准曲线

    2

    按实验方案在对应孔加入100ul标准品和样本,标准品,样本及空白孔均做复孔。

    3

    用塑料膜封板,室温(18-25.℃)孵育2小时

    4

    去掉封板膜,按以下程序洗板:

    a.  吸出孔内液体。

    b.  每孔加入300ul1X的洗涤缓冲液

    c.  吸出孔内液体

    d.  重复步骤bc两次

    5

    加入50ul生物标记的IL-27抗体到各孔

    6

    用封板膜,封板,室温(18-25.℃)孵育1小时

    7

    重复步骤4

    8

    加入100ul亲和素-HRP溶液到各孔

    9

    用塑料膜封板,室温(18-25.℃)孵育30min

    10

    重复步骤4

    11

    加入100ul即用型TMB底物溶液至各孔

    12

    室温避光孵育10-20min,用铝箔包住反应板,   避免光照。

     

    13

    加入100ul   H2SO4到各孔,终止反应。

    在分光光度计中读取结果。450nm作为初始波长,630nm作为参考波长。

    更多产品订购,请联系Diaclone 中国区总代理北京博蕾德生物科技有限公司。


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